Qu'est-ce que méthode immuno-enzymatique elisa ?

La méthode immuno-enzymatique ELISA, acronyme de "Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay", est une technique utilisée en immunologie pour détecter et quantifier la présence d'antigènes spécifiques ou d'anticorps dans un échantillon biologique.

Le principe de l'ELISA repose sur la réaction entre un antigène et un anticorps spécifique. L'antigène cible est immobilisé sur une surface solide, comme une plaque de microtitration ou un support membranaire. L'échantillon biologique, pouvant contenir l'anticorps correspondant à l'antigène cible, est ajouté à la surface contenant l'antigène immobilisé. Si l'anticorps est présent dans l'échantillon, il va se fixer spécifiquement à l'antigène, formant ainsi un complexe antigène-anticorps.

Pour détecter la formation de ce complexe, une deuxième interaction est nécessaire. On ajoute un autre anticorps, appelé anticorps conjugué, qui est spécifique de l'anticorps humain. Cet anticorps conjugué est marqué avec une enzyme, comme la peroxydase ou la phosphatase alcaline. Lorsque l'anticorps conjugué se lie spécifiquement à l'anticorps humain, il forme un complexe et permet ainsi l'activation de l'enzyme.

Ensuite, un substrat est ajouté, qui est spécifique de l'enzyme utilisée. Lorsque le substrat est métabolisé par l'enzyme, il change de couleur ou produit une réaction chimique visible. Cette réaction peut être détectée par différents moyens, tels que la mesure de la couleur de la solution ou l'utilisation d'un spectrophotomètre.

La quantité d'antigène présent dans l'échantillon peut être déterminée en comparant l'intensité de la réaction de l'échantillon avec celle des échantillons témoins de concentration connue. Une courbe d'étalonnage est établie pour calculer la concentration de l'antigène inconnu à partir de cette comparaison.

L'ELISA est une technique largement utilisée en recherche biomédicale, en diagnostic médical et en industrie biotechnologique. Elle permet de détecter différentes substances, telles que des protéines, des hormones, des virus ou des bactéries, avec une grande sensibilité et spécificité. De plus, l'ELISA peut être automatisé pour traiter de grands nombres d'échantillons, ce qui en fait une méthode pratique en laboratoire.

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